文章摘要:【背景】芳樟醇具有特殊的香气和多种生物学活性，是食品、医药和化妆品行业的重要原料。随着合成生物学的高速发展，代谢改造微生物进行芳樟醇生物合成是当前研究的一大热点。然而在微生物的生物合成中，芳樟醇对底盘细胞的毒性是一大瓶颈问题，也是其他单萜物质生物合成的共性问题。【目的】建立合理的耐受性改造方法，以提高微生物宿主细胞对芳樟醇的耐受性。【方法】以酿酒酵母BY4741为研究对象，通过对ABC转运蛋白、活性氧调控相关酶及转录调控因子的过表达，考察了它们对酿酒酵母芳樟醇耐受性的影响，并通过对酿酒酵母细胞进行定向驯化，筛选耐受性提高的酿酒酵母突变株。【结果】单独过表达ABC转运蛋白（Yor1、Snq2、Pdr5、Pdr15和Pdr18）、ROS调控相关酶（Gre2、Ctt1、Yhb1、Gpx2、Trr1、Trx2和Gsh2）及转录调控因子（Ino2、Yap1、Yap5和Stb5）并不能有效提高酿酒酵母的耐受性，但在传代适应性驯化过程中获得了两株耐受性提高的酿酒酵母突变株，将芳樟醇的致死浓度从430 mg/L提高到了645 mg/L以上。进一步通过基因组重测序分析揭示了驯化菌株突变位点。其中YBR074W、YBR172C、YHR007C和YMR275C四个基因的突变对耐受性的提高具有重要影响。【结论】本研究通过进化工程成功提高了酿酒酵母对芳樟醇的耐受性，为今后单萜耐受性机制的研究提供了参考，为单萜的异源合成提供了优良的底盘细胞。

文章关键词:

论文作者:李言 笪心怡 张雨晨 方馨 周萍萍 

作者单位:扬州大学生物科学与技术学院 

论文DOI:10.13344/j.microbiol.china.211198

论文分类号:TQ243.4;Q78

文章来源：《酿酒科技》 网址: http://www.njkjzz.cn/qikandaodu/2022/0519/1310.html

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